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摘要
目的 研究热打击单核细胞来源外泌体对肝细胞炎症损伤的影响及其与外泌体miR-155的关系。方法 将单核细胞THP-1分为对照组、热打击组、乌司他丁组，分别提取3组细胞的外泌体，将其孵育肝细胞系HepG2细胞后，检测肝细胞上清中谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)水平，肝细胞存活率，以及肝细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-6(IL-6) mRNA水平，评估外泌体对肝细胞的作用；采用RT-qPCR检测单核细胞来源外泌体中miR-155含量的变化；通过数据库检索、双重荧光素酶报告基因检测及Western blotting实验分析miR-155的潜在靶点；观察热打击单核细胞外泌体对肝细胞miR-155的影响，以及使用乌司他丁或miR-155抑制剂处理对这些外泌体功能的影响。结果 热打击单核细胞来源外泌体使肝细胞上清ALT及LDH水平、TNF-α mRNA及IL-6 mRNA水平明显增高(P<0.01)，细胞存活率下降(P<0.05)；热打击能增加单核细胞及其释放外泌体内含的miR-155水平；miR-155可能以细胞因子信号传导抑制分子1(SOCS1)作为靶基因发挥作用；采用热打击单核细胞外泌体孵育肝细胞可使后者miR-155水平增高，乌司他丁或miR-155抑制剂能降低热打击单核细胞外泌体miR-155水平并减少肝细胞TNF-α和IL-6 mRNA的表达，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 热打击单核细胞可上调肝细胞炎性因子导致的炎症损伤，这可能是通过释放外泌体miR-155至肝细胞并以SOCS1为潜在靶点实现的；乌司他丁可能缓解此条件下肝细胞内炎性因子mRNA的表达。
