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摘要
目的:研究不含POU结构域的八聚体结合蛋白(non-POU domain containing octamer-binding protein,NONO)基因沉默对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以期探讨NONO在鼻咽癌进展中的作用。方法 :采用蛋白质印迹法检测正常鼻咽上皮细胞NP-69以及鼻咽癌细胞CNE1和CNE2中NONO蛋白的表达。用含有靶向人NONO基因的sh RNA重组慢病毒感染鼻咽癌CNE2细胞,嘌呤霉素筛选后,采用蛋白质印迹法检测NONO基因的表达沉默效果。采用CCK-8法、平板克隆形成实验、细胞划痕愈合实验、体外Transwell迁移和侵袭实验分别检测NONO基因沉默对CNE2细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力的影响。结果:鼻咽癌细胞CNE1和CNE2中NONO蛋白表达水平比正常鼻咽上皮细胞NP-69明显升高(P值均<0.05)。感染NONO-sh RNA重组慢病毒后,CNE2细胞中NONO基因沉默效率接近100%。与未感染或感染阴性对照慢病毒的CNE2细胞相比,NONO基因沉默后的CNE2细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力均明显降低(P值均<0.05)。结论 :NONO基因沉默可抑制CNE2细胞的体外增殖、迁移及侵袭,提示NONO可能是一个潜在的促进鼻咽癌发生和发展的重要调控蛋白。
- 出版日期2016
- 单位广东医科大学
