过表达干扰素调节因子IRF1重塑K562细胞的稳态特征

作者：王文天; 赵慧娟; 杨洋; 池颖; 张磊

来源：中国实验血液学杂志, 2020, 28(01): 51-55.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2020.01.009

• K562细胞
• 干扰素调节因子1
• 细胞增殖
• 凋亡
• 红系分化

目的:考察干扰素调节因子IRF1对K562细胞稳态及分化的影响。方法:构建3种不同的过表达载体以筛选实现IRF1增强表达的最佳方式;通过细胞计数考察IRF1对细胞增殖的影响;通过凋亡标记分析IRF1对药物诱导凋亡的影响;通过分化标记分析IRF1对红系分化的影响;通过RT-q PCR初步探索IRF1的调控机制。结果:利用P2A-T2A方式构建的单一开放阅读框具有最明显的表达效果,是实现IRF1增强表达的最佳方式;细胞计数结果发现,IRF1对K562的增殖无明显影响;Annexin V和7-AAD联合标记发现,IRF1过表达显著抑制细胞的凋亡进程;流式结果显示,IRF1同样可进一步提升CD71~+CD235a~+双阳细胞比例,RT-qPCR检测证实了IRF1过表达对CD235a的调控作用。结论:IRF1过表达改变了K562细胞的稳态特征,增强细胞的抗凋亡能力并促进了向下游分化的潜力,提示IRF1在红系系统发育中可能发挥重要的调控功能。

• 出版日期2020
• 单位中国医学科学院血液病医院(血液学研究所); 河南科技大学; 实验血液学国家重点实验室