大肠杆菌glgC基因的定点突变及高效表达

作者：姚庆荣; 郭运玲; 孔华; 张金文; 郭安平; 贺立卡; 刘恩平

来源：热带作物学报, 2007, (01): 60-64.

DOI：10.3969/j.issn.1000-2561.2007.01.013

• glgC基因
• 定点突变
• 原核表达

通过PCR方法,从E.coliJM109基因组DNA中扩增到全长为1296bp的glgC基因,对其进行定点突变,获得第296位和336位氨基酸同时突变的glgC336基因。将2者亚克隆进pET-30a,成功构建了重组表达载体pET-C和pET-C336,转化大肠杆菌BL21(DE3),在1mmol/LIPTG诱导下进行表达。SDS-PAGE电泳分析显示,在约53kD处有1条明显的蛋白表达带,证明目的基因已得到高效表达,且重组蛋白表达量占菌体蛋白总量的77.3%。

• 出版日期2007
• 单位甘肃农业大学; 中国热带农业科学院; 中国热带农业科学院热带生物技术研究所