Pkd2基因低表达调控ERK1/2途径诱导血管平滑肌细胞表型转化

作者：夏红; 周湘鸿; 彭文; 彭科; 黄加强; 宋彦军

来源：实用预防医学, 2016, 23(08): 992-996.

• 主动脉夹层
• 血管平滑肌细胞
• 表型转化
• Pkd2基因
• ERK

目的探讨ERK1/2途径是否参与Pkd2基因低表达诱导主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化及可能分子机制。方法原代培养小鼠主动脉VSMCs,转染Pkd2+/-突变载体,构建Pkd2基因低表达细胞模型。实验共分为空白对照的Control组、Pkd2+/-组、空病毒组、Ets1组(Pkd2促进剂)、PD98059组(ERK抑制剂)、EGF组(ERK激动剂)。Western blot检测多囊蛋白2(PC2,Pkd2编码蛋白)、a-SMA(VSMCs收缩型标志蛋白)、骨桥蛋白(OPN,VSMCs增殖型标志蛋白)、ERK1/2、ERK磷酸化蛋白(P-ERK1/2)表达水平;RT-PCR检测PC2、a-SMA、OPN、ERK1、ERK2 mRNA表达水平;MTT法检测细胞增殖。结果 (1)Pkd2+/-组中PC2蛋白及mRNA表达明显下调,Pkd2基因低表达模型构建成功。(2)Pkd2+/-组中a-SMA表达下调、OPN表达升高,VSMCs细胞增殖明显,细胞发生了表型转化;加入Ets1后被明显抑制(P<0.05)。(3)Pkd2+/-组中ERK1/2及P-ERK1/2表达明显升高,加入PD98059后表达被抑制,但PC2表达无变化(P<0.05)。(4)Pkd2+/-组中加入PD98059后,a-SMA表达升高、OPN表达下调,VSMCs细胞增殖被抑制,细胞表型转化被抑制。结论 Pkd2基因低表达可以诱导小鼠主动脉VSMCs表型转化,这一过程可能与ERK1/2异常活化有关。

• 单位
  中南大学湘雅二医院; 长治医学院; 湘潭市中心医院