H5、H7和H9亚型禽流感病毒液相芯片检测方法的建立

作者：张晓娜; 王慧煜; 梅琳; 韩雪清; 林祥梅; 张书霞

来源：中国兽医科学, 2013, (05): 494-499.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2013.05.012

• 液相芯片
• 核酸杂交
• 禽流感病毒
• 快速检测 liquid chip
• hybridization
• avian influenza virus
• rapid detection

为应用液相芯片技术建立同时检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒(AIV)的方法,在GenBank中收集H5、H7、H9亚型AIV的HA基因序列,利用DNAMAN软件分析比较筛选出特异的保守片段,设计引物和探针。将多重不对称RT-PCR扩增产物与偶联荧光微球的探针进行杂交,建立多重液相芯片方法。结果显示,多重液相芯片技术对H5、H7、H9亚型AIV核酸的最低检出量分别为18.5、28.7、20.7pg/μL,检测的特异性和重复性都很好,应用该方法和禽流感检测试剂盒双盲试验同时对50份已知病毒的样品进行了检测,两者符合率为100%。该方法为禽流感病毒核酸液相芯片的进一步研究奠定了基础。

• 出版日期2013
• 单位南京农业大学; 中国检验检疫科学研究院