拟南芥基因组中注释为异胡豆苷合成酶的基因克隆及异源表达

作者：马磊; 张翔; 田永强; 张国林; 罗应刚

来源：应用与环境生物学报, 2013, 19(02): 224-230.

DOI：10.3724/SP.J.1145.2013.00224

• 萜类吲哚生物碱
• 异胡豆苷合成酶
• 拟南芥
• RT-PCR
• PCR
• 异源表达 terpenoid indole alkaloids
• strictosidine synthase
• Arabidopsis thaliana
• RT-PCR
• PCR
• heterologous expression

拟南芥(Arabidopsis thaliana)是生物学研究中广泛使用的模式生物.到目前为止,没有证据表明拟南芥中存在复杂生物碱,但对其基因组数据的生物信息学分析表明,有很多基因与萜类吲哚生物碱(TIAs)生物合成途径中的相关基因有高度的同源性.为了从分子水平研究拟南芥是否具有合成该类复杂生物碱的潜力,首先对拟南芥中可能编码异胡豆苷合成酶(STR)的15个基因及其编码的酶进行广泛的生物信息学分析和计算;在此基础上,选择其中5个AtSTR基因为目的基因,设计特异性引物;从拟南芥中提取总RNA,一步法RT-PCR克隆得到上述基因;通过TA克隆将上述基因转入pGM-T载体,筛选、酶切及PCR鉴定,...

• 出版日期2013
• 单位四川大学; 中国科学院成都生物研究所