酿酒酵母SNF4基因敲除缺失菌株的构建

作者:林晓华; 柯崇榕; 吴毕莎; 郑永标; 李力; 陈由强; 黄建忠
来源:生物工程学报, 2011, (04): 572-578.
DOI:10.13345/j.cjb.2011.04.014

摘要

构建一株酿酒酵母SNF4基因缺失菌株并研究其对乙醇产量的影响。扩增带有SNF4基因上下游同源序列和Kanr筛选标记的SNF4基因敲除组件,转化到酿酒酵母YS2获得阳性克隆子,然后将质粒pSH65转到阳性克隆子中,半乳糖诱导pSH65表达Cre酶切除Kanr筛选标记,获得SNF4等位基因完全缺失菌株YS2-△SNF4。发酵实验结果表明,缺失菌株YS2-△SNF4乙醇产量较出发菌株提高了7.57%。利用Cre-LoxP系统,成功构建了SNF4等位基因完全缺失菌株并提高乙醇产生量。

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