大眼鰤鲈鱼真皮肿瘤病毒(WDSV)辅助基因orfA和orfC多抗的制备及初步应用

作者：李铎; 徐坤; 王亮亮; 周罡; 麻丽霞; 张智英

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2012, (10): 23-30.

DOI：10.13207/j.cnki.jnwafu.2012.10.035

• 大眼鰤鲈鱼真皮肿瘤病毒
• orfA基因
• orfC基因
• 原核表达
• 多克隆抗体 Walleye dermal sarcoma virus(WDSV)
• orfA
• orfC
• prokaryotic expression
• polyclonal antibody

【目的】制备大眼鰤鲈鱼真皮肿瘤病毒(WDSV)辅助基因orfA和orfC的多克隆抗体,并用其检测酵母和肿瘤细胞中目的蛋白的表达。【方法】以WDSV基因组序列为模板,PCR扩增WDSVorfA和orfC基因,分别构建其原核表达载体,转化Rosseta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白后,采用皮下多点注射结合耳静脉加强免疫的方法免疫新西兰白兔,制备抗orfA和抗orfC的多克隆抗体,用Western blot法检测抗体的特异性。用制备的多克隆抗体检测orfA和orfC融合蛋白在酵母和HeLa299、SPC-A-1肿瘤细胞中的表达。【结果】PCR扩增获得了WDSVorfA和orf...

• 出版日期2012
• 单位西北农林科技大学