Toll样受体4小干扰RNA表达载体的构建及鉴定筛选

作者：耿红莲; 王爱华; 陆慧琦; 赵文静; 邓燕; 竺蓓; 仲人前

来源：中国实验诊断学, 2010, (10): 1509-1511.

• Toll样受体4
• 小干扰RNA
• 表达载体
• 转染 Toll like receptor 4
• small interference RNA
• plasmid expression vector
• transfection

目的构建并筛选到能有效抑制TLR4基因表达的小干扰RNA表达载体,用于研究TLR4基因功能。方法 RNA干扰采用体外构建小干扰RNA表达载体法,将构建好的表达载体转染单核细胞株,分别用流式细胞术和实时荧光定量RT-PCR法检测TLR4蛋白和mRNA表达变化,筛选抑制效率最高的小干扰RNA表达载体。结果成功构建了TLR4小干扰RNA表达载体,并经电泳及测序证实;编号为S8-1的载体转染入细胞后,TLR4阳性率为27.03%,显著低于对照组的35.12%;流式细胞术和实时荧光定量RT-PCR法检测均证实编号为S8-1小干扰RNA表达载体的抑制效率最高,可用于后续实验。结论本实验所构建的编号为S8-...

• 出版日期2010
• 单位中国人民解放军第二军医大学