微小隐孢子虫三个基因主要抗原表位区的串联表达及其抗原性分析

作者：秦培兰; 李艳; 米荣升; 呼高伟; 黄燕; 周鹏; 张国恩; 苏庆美; 曹薇; 陈兆国

来源：中国动物传染病学报, 2012, (03): 36-43.

• 微小隐孢子虫
• 抗原表位
• 重叠延伸PCR
• 原核表达
• 抗原性 Cryptosporidium parvum
• antigen epitope
• gene splicing by overlap extension PCR
• prokaryotic expression
• antigenicity

应用多个抗原表位预测软件对微小隐孢子虫CP15、P23和CP15/60三个子孢子表面抗原的氨基酸序列进行T细胞表位预测及分析,从中选取了三个抗原表位富集的基因片段,利用重叠延伸PCR(gene splicing by overlapping extension PCR,SOE PCR)将该三个基因片段串联在一起,各基因片段之间以柔性氨基酸(GGGGS)碱基序列链接,得到的拼接片段命名为CpTm。将目的基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组表达质粒pET-CpTm,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。结果成功地构建...

• 出版日期2012
• 单位中国农业科学院; 中国农业科学院上海兽医研究所