四种光敏剂介导的体外光动力抗白色念珠菌效果的研究

作者:齐琪; 蓝丽娜; 黄力毅*; 李峥; 杨倩; 滕春玲
来源:中国激光医学杂志, 2019, 28(06): 301-307.
DOI:10.13480/j.issn1003-9430.2019.0301

摘要

目的探讨4种不同类型光敏剂:亚甲基二甲基蓝(9-dimethylmethylene blue,DMMB)、菌绿素38(Bacteriochlorins 38,BC38)、玫瑰红(Rose Bengal,RB)和尼罗蓝衍生物(5-Ethylamino-9-diethylminobenzo[a]phenothiazinium chlorin,EtNBS),分别介导的光动力抗菌疗法(antimicrobial photodynamic therapy,APDT)对白色念珠菌的体外杀菌效果。方法以白色念珠菌标准株DAY 286为实验对象,将实验分为4大组:光动力治疗组(APDT组)、单纯光敏剂对照组、单纯光照组及空白对照组。(1)APDT组:根据光敏剂种类不同分为4小组,DMMB组、BC38组、RB组和EtNBS组。不同浓度的各组光敏剂1ml分别与107菌落数/ml白色念珠菌1 ml混合,避光孵育30 min后,DMMB组和EtNBS组选取波长660 nm光源照射;BC38组选取波长730 nm光源照射;RB组选择波长540 nm光源照射,每组照射光剂量能量密度均为10 J/cm2。(2)单纯光敏剂对照组:分组方式与APDT组相同,各种不同类型光敏剂与菌悬液混合,避光孵育30 min后,不予任何光照。(3)单纯光照组:无光敏剂,菌液避光孵育30 min后,予APDT组相同条件光源照射。(4)空白对照组:无光敏剂,不予任何光照。实验后的菌悬液经连续梯度稀释接种于培养基,孵育24~36 h,进行菌落计数。结果在能量密度10 J/cm2条件下,各光敏药物的浓度分别为DMMB为10μM;BC38为5μM;RB为50μM;EtNBS为10μM,均清除了99. 99%白色念珠菌。当光敏剂浓度为5μM,光能量密度为10 J/cm2时,DMMB、BC38、RB、EtNBS介导的APDT使真菌存活率分别下降99. 992%、99. 999%、3. 5%和99. 980%。除APDT组外,其余两组白色念珠菌存活率无明显下降,与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。结论光能量密度一定时,APDT效果随光敏剂浓度增加而增强。相同光敏剂浓度及光能量密度条件下,DMMB、EtNBS及BC38对白色念珠菌的APDT效果优于RB。