基于VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路探讨益气润肠方治疗气虚型便秘大鼠的作用机制

作者：熊润秋; 高月; 陈鲁^*

来源：中医药信息, 2023, 40(09): 10-15.

DOI：10.19656/j.cnki.1002-2406.20230902

• 功能性便秘
• 血管活性肠肽-环磷酸腺苷-蛋白激酶A-水通道蛋白3信号通路
• 洛哌丁胺
• 益气润肠方

目的：基于VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路探讨益气润肠方对气虚便秘模型大鼠作用及其机制。方法：选取48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、乳果糖组、益气润肠方低剂量组、益气润肠方中剂量组和益气润肠方高剂量组，每组8只。空白组大鼠正常饮食，每日给予生理盐水灌胃，其余大鼠给予洛哌丁胺混悬液3 mg/（kg·d）灌胃加饥饱饮食2周制作气虚便秘模型。造模成功后，空白组及模型组每日给予生理盐水灌胃，乳果糖组给予乳果糖口服溶液1.67 g/（kg·d）灌胃，益气润肠方高、中、低剂量组分别给予益气润肠方17.5、8.75、4.375 g/（kg·d）灌胃，连续2周。14 d后称量大鼠粪便湿重、粪便干重并计算粪便含水率；留取结肠组织，采用苏木精伊红染色法观察结肠病理变化，qPCR检测大鼠结肠血管活性肠肽（VIP）、环磷酸腺苷（cAMP）、蛋白激酶A(PKA)、水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达水平，Western blot检测大鼠VIP、AQP3蛋白表达水平。结果：与空白组比较，模型组大鼠体质量明显降低（P <0.01），粪便湿重及粒数明显减少（P <0.01）；与模型组比较，益气润肠方低、中、高剂量组和乳果糖组体质量明显增高（P <0.01,P <0.05），粪便湿重增加、粪便粒数增多（P <0.05,P <0.01），但粪便含水率无统计学意义（P> 0.05）。与乳果糖组比较，益气润肠方中、高剂量组粪便湿重明显增加、粪便粒数显著增多（P <0.05）。与空白组比较，模型组VIP、cAMP、PKA、AQP3 mRNA表达水平明显降低（P <0.01,P <0.05）；与模型组比较，乳果糖组及益气润肠方各剂量组VIP、cAMP、PKA、AQP3 mRNA表达水平明显升高（P <0.05,P <0.01），益气润肠方高剂量组效果最显著（P <0.01），且优于乳果糖组（P <0.05）。与模型组比较，益气润肠方各剂量组VIP、AQP3的蛋白表达水平升高，且呈剂量依赖性（P <0.05）。益气润肠方可以明显改善咯派丁胺造成的便秘大鼠的肠道病理形态损害。结论：益气润肠方可通过调控VIP-cAMP-PKA-AQP3通路治疗大鼠气虚型便秘。

• 出版日期2023
• 单位山东中医药大学附属医院; 山东中医药大学