口蹄疫病毒非结构蛋白定量检测ELISA方法的建立

作者：李永亮; 卢曾军; 杨苏珍; 田美娜; 谢宝霞; 刘在新

来源：中国生物工程杂志, 2009, (11): 70-73.

DOI：10.13523/j.cb.20091113

• 口蹄疫病毒
• 单克隆抗体
• 非结构蛋白
• 定量ELISA Foot-and-mouth disease virus(FMDV) Monoclonal antibody (MAb) Non-structural protein(NSP) Quantitative ELISA

目的:利用口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体建立液相阻断ELISA检测方法,进行定量检测口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白含量。方法:首先将工作浓度的3B单抗与待测病毒培养液过夜结合反应,然后取结合液转移至用3B蛋白包被好的酶标板上,用标准3B蛋白做12个梯度做对照,同时设阴性对照和空白对照。通过回归分析算出口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白3B含量。结果:回归曲线呈典型的S形,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R=0.99,检测范围为5～1500ng/ml,半数抑制浓度(Ic50)为130ng/ml。结论:该方法能特异、敏感的检测到病毒培养液中的非结构蛋白3B成分,并进行定量。

• 出版日期2009
• 单位家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 河南省农业科学院