去氢骆驼蓬对PC12和NCTC1469细胞增殖与凋亡的影响

作者：陈蓓; 马丽娟; 李丽华; 文丽梅; 高惠静; 王建华; 赵军

来源：中国病原生物学杂志, 2018, 13(01): 59-67.

DOI：10.13350/j.cjpb.180112

• 去氢骆驼蓬碱
• 增殖
• 凋亡
• PC12细胞
• NCTC1469细胞

目的探讨去氢骆驼蓬碱Harmine(HM)对小鼠肝细胞NCTC1469和神经细胞PC12增殖与凋亡的影响,为去氢骆驼蓬碱衍生物作为抗包虫病候选药物的研发提供参考。方法体外培养的小鼠肝细胞NCTC1469和神经细胞PC12分为HM干预组和无药物组对照组,用噻唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度HM作用不同时间对细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜下观察药物作用后的细胞形态改变;采用Hoechst 33258核染色法观察细胞凋亡的形态学变化,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 MTT检测去氢骆驼蓬碱可抑制PC12和NCTC1469和细胞的增殖,该抑制作用呈时间-浓度依赖(F值分别为126.43、125.32、145.82,P<0.01;F值分别为147.95、222.67、242.28,P<0.01)。HM处理PC12细胞24、48、72h的IC50分别为32.40、24.50和15.37μg/ml,HM处理PC12细胞24、48、72h对NCTC1469细胞的IC50分别为62.19、38.43和28.52μg/ml。对照组细胞贴壁生长,排列均匀,大小基本一致,轮廓清晰,悬浮细胞少;实验组随着去氢骆驼蓬碱浓度的升高,细胞出现皱缩,细胞数量及生长密度逐渐减少。Hoeehst33258染色观察去氢骆驼蓬碱干预24h后细胞核均出现不同程度蓝色荧光,可见核致密、浓染等典型的细胞凋亡特征。10、20、40μg/ml去氢骆驼蓬碱干预24h,PC12细胞总凋亡率分别为(12.52±2.21)%、(23.44±1.27)和(55.85±2.30)%,NCTC1469细胞总凋亡率分别为(15.20±2.67)%、(41.31±3.09)和(53.92±2.58)%,与对照组比较差异均有统计学意义(t值分别为-27.42、-48.73、-93.76,P<0.01;t值分别为-76.00、-116.67、-144.25,P<0.01)。结论去氢骆驼蓬碱能抑制PC12、NCTC1469细胞增殖,促进细胞凋亡,且存在正向的剂量-效应关系。

• 出版日期2018
• 单位新疆医科大学第一附属医院