鞘蕊苏赤霉素氧化酶基因的克隆及表达研究

作者:黄晓; 张恬; 马朝芝; 刘焱文; 余坤*; 黄必胜*
来源:中国现代中药, 2019, 21(10): 1362-1366.
DOI:10.13313/j.issn.1673-4890.20190101006

摘要

目的:克隆和表达鞘蕊苏赤霉素氧化酶基因,为提高湖北栽培的鞘蕊苏有效成分含量奠定基础。方法:提取鞘蕊苏叶片的总RNA,利用套式聚合酶链式反应(PCR)技术克隆获得CfGA01基因全长。结果:完整的赤霉素氧化酶基因全长1234 bp,编码355个氨基酸,命名为CfGA01;通过构建系统进化树比较CfGA01与其他物种中的赤霉素氧化酶基因的亲缘关系,发现CfGA01与丹参GA蛋白的亲缘关系比较近,最后成功构建了赤霉素氧化酶基因原核表达载体PGCfGA01,并成功进行了表达。结论:克隆得到鞘蕊苏赤霉素氧化酶基因全长并构建原核表达载体,为研究鞘蕊苏有效成分合成酶奠定了基础。

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