杆状病毒-昆虫细胞系统表达的戊型肝炎病毒衣壳蛋白p495的纯化、结构解析以及免疫原性分析

作者：林庆山; 蒋婕; 李婷婷; 张玉云; 张振勇; 郑明华; 王凯航; 郑清炳; 俞海; 顾颖; 夏宁邵; 李少伟

来源：病毒学报, 2016, (03): 342-348.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002948

• 戊型肝炎病毒
• 病毒样颗粒
• 真核表达系统
• HEVP495蛋白冷冻电镜三维重构
• 免疫应答 Hepatitis E virus
• Virus-like particle
• Eukaryotic expression system
• Cryo-EM 3D reconstruction
• Immune response

本研究目的是利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统建立戊型肝炎病毒(HEV)p495蛋白的高效稳定表达和可放大纯化的方法,研究其理化性质和解析三维结构,与上市戊肝疫苗益可宁(Hecolin)进行免疫原性的比较。本研究选择基因1型HEV毒株的开放读码框2(ORF2)的aa112-606片段构建杆状病毒,感染昆虫细胞进行重组蛋白的表达,经过PEG沉淀和阴离子交换层析的纯化,获得纯度为95%以上的p495蛋白,每升细胞培养液最终获得15mg的目的蛋白。经ELISA、分析超离、分子排阻色谱和电镜负染等分析显示p495蛋白具有良好的抗原性且呈现为均一的病毒样颗粒(VLP),沉降系数为51.3S,颗粒直径约20n...

• 出版日期2016
• 单位厦门大学