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摘要
研究三叶香茶菜含药血清对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)活化的抑制作用及机制。将LPS诱导的HSC分为空白对照组、LPS模型组、秋水仙碱含药血清组、LPS+空白血清对照组、三叶香茶菜含药血清组、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)阻断剂组、TLR4阻断剂+三叶香茶菜含药血清组。四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)法检测HSC增殖，酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)法测定HSC中Ⅰ型胶原蛋白(typeⅠcollagen, COLⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、血管内皮细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,caspase-1)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)。实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)检测HSC中TLR4、IκBα、NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、核因子-κB(NF-κB)p65、gasdermin D(GSDMD)、凋亡相关微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)mRNA表达；蛋白免疫印迹(Western blot, WB)检测HSC中TLR4、p-IκBα、NF-κB p65、NLRP3、ASC、GSDMD蛋白水平。结果显示三叶香茶菜含药血清可抑制HSC细胞增殖活性，并对HSC中COLⅠ、COLⅢ、α-SMA、TGF-β1、caspase-1、MCP-1、VCAM-1、ICAM-1的分泌具有抑制作用；与LPS模型组比，三叶香茶菜含药血清组、秋水仙碱含药血清组及TLR4阻断剂组p-IκBα、NLRP3、NF-κB p65、GSDMD、ASC表达显著下调，IκBα表达显著上调；与TLR4阻断剂组比，TLR4阻断剂+三叶香茶菜含药血清组TLR4、p-IκBα、NLRP3、NF-κB p65、GSDMD、ASC表达显著降低，IκBα表达显著升高。综上，三叶香茶菜含药血清通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路下调HSC的活化。
