青蒿琥酯通过自噬通路诱导乳腺癌细胞G2/M周期阻滞

作者：寿柳梅; 陈凯; 林芳; 吴梦瑶; 沈梦; 龚斐然; 陶敏; 李伟

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(04): 555-558.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.04.007

• 青蒿琥酯
• 自噬
• 乳腺癌
• 细胞周期

目的探讨青蒿琥酯(ART)对乳腺癌细胞周期的影响及分子机制。方法通过流式细胞仪检测细胞周期;通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot检测p21、Beclin1基因表达;通过细胞免疫荧光检测自噬体形成;通过自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)阻断自噬通路,检测ART对乳腺癌细胞细胞周期的影响是否通过自噬依赖性机制。结果对照组G2/M期细胞比例为(9.64±0.74)%,ART组为(16.67±3.29)%,两组比较差异有统计学意义(t=3.614,P=0.022);ART组p21 mRNA表达水平增加(14.28±0.10)倍(t=23.094,P=0.000),蛋白表达增加(1.58±0.80)倍(t=7.330,P=0.018);提示ART上调细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(CKI)家族成员p21的表达,并使乳腺癌细胞MCF-7细胞周期阻滞于G2/M期。与对照组比较,ART组Beclin1 mRNA表达水平增加(1.71±0.14)倍(t=8.583,P=0.006),蛋白表达增加(1.61±0.91)倍(t=8.553,P=0.009);胞质内微管相关蛋白1轻链3(LC3)荧光斑点增加(2.79±0.42)倍(t=7.342,P=0.018),提示ART能够诱导MCF-7细胞发生自噬。3-MA联合ART组与3-MA组比较,p21蛋白表达量、G2/M期细胞比例差异无统计学意义。提示自噬抑制剂3-MA阻断自噬通路,可削弱ART诱导的p21表达上调和G2/M期阻滞。结论ART通过诱导乳腺癌细胞自噬,导致G2/M期阻滞。

• 出版日期2017
• 单位苏州大学附属第一医院; 苏州大学; 浙江中医药大学