As_2O_3诱导NB4、HL-60细胞凋亡的机制研究

作者：张雪莲; 周尊海; 张利强; 王博; 贾玉芳; 梁爱斌

来源：同济大学学报(医学版), 2016, 37(03): 8-15+27.

DOI：10.16118/j.1008-0392.2016.03.002

• As2O3
• 细胞凋亡
• NB4
• HL-60
• survivin
• p53

目的探讨三氧化二砷(As_2O_3)在体外抑制急性早幼粒白血病(acute promyelocyticleukemia,APL)细胞NB4、HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡的分子机制。方法通过WST-8法检测上述两个细胞株的增殖抑制曲线;用Annexin V/PI流式细胞术检测细胞的凋亡;用Real time PCR检测凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2、Bax、p53、C-m yc、Survivin在As_2O_3处理前后的表达变化,同时用Westernblot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2、Bax、P53在As_2O_3处理前后的表达变化。结果 As_2O_3能够显著抑制两种细胞增殖,Westernblot检测及Realtime PCR结果显示,As_2O_3处理引起了两种细胞中Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9基因表达水平增加,且蛋白表达水平上都出现了活性形式的Caspases。NB4细胞中Survivin、C-m yc、Bcl-2的基因表达水平都显著降低,突变型p53蛋白在细胞内的量同样显著下降;HL-60细胞的C-m yc表达水平显著降低,但Survivin、Bcl-2表达水平无明显变化。结论 As_2O_3能在药物临床浓度范围内有效抑制急性早幼粒白血病细胞HL-60、NB4的细胞增殖,但方式不同;1.5μmol/L浓度的As_2O_3对NB4细胞生长的抑制体现在诱导细胞分化并诱导细胞凋亡,对HL-60细胞生长的抑制只体现在诱导细胞分化。HL-60细胞中高表达的Survivin、Bcl-2抑制了细胞的凋亡。NB4、HL-60细胞株中P53基因的细胞遗传学变异的不同可能是As_2O_3对这两种细胞增殖抑制机制差异的主要原因之一。

• 出版日期2016
• 单位同济大学; 济宁市第一人民医院; 同济医院; 上海市杨浦区中心医院