摘要

为了解酪氨酸酚裂解酶(TPL)热稳定性与序列之间的关系,为突变产生耐热性的酪氨酸酚裂解酶提供参考,利用生物信息学对来源于Symbiobacterium toebii的耐热酪氨酸酚裂解酶St TPL、来源于Fusobacterium nucleatum的耐热酪氨酸酚裂解酶Fn TPL和来源于Citrobacter freundii的中温酪氨酸酚裂解酶Cf TPL进行进化树、一级结构、二级结构和三级结构的比较。随着TPL中一级结构中脯氨酸含量增多,最适反应温度的增加,St TPL、Fn TPL和Cf TPL的脯氨酸含量分别为5.02%、3.70%、2.85%,二级结构中β-折叠和转角较多,分别为25.51%、25.00%、23.91%,这些特征符合文献报道的耐热酶和中温酶的区别。将St TPL、Fn TPL和Cf TPL的三维结构叠加比对发现,310-313残基区域、残基13、82-88残基区域叠加效果差,313残基突变有利于Cf TPL提高热稳定性,St TPL中的Ala13、Glu83、Thr407突变有利于St TPL热稳定性,推测以上残基区域和热稳定性相关,也符合已有文献报道的情况。此外,有关生物信息学分析为进一步理解超稳酶的超稳机制以及筛选改造新的超稳酶提供了初步参考。

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