口蹄疫病毒一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者：李金海; 李兴玉; 曹三杰; 文心田; 陈斌; 张毅; 周哲学

来源：中国人兽共患病学报, 2013, (04): 380-384+407.

• 口蹄疫病毒
• TaqMan-MGB
• 荧光定量RT-PCR foot-and-mouth virus
• TaqMan-MGB
• real-time quantitative RT-PCR

目的建立一种能快速、高效、敏感、特异地检测口蹄疫病毒(FMDV)的一步法荧光定量RT-PCR检测方法。方法根据FMDV聚合酶3D基因序列比对结果,设计特异性引物和MGB探针;通过优化,得到最佳反应体系和反应条件;分别以质粒和病毒RNA为模板,构建标准曲线;并进行特异性、敏感性、重复性试验。结果该方法能特异性检测A型、O型、Asia 1型FMDV,而对猪瘟、猪蓝耳病、猪圆环病毒、猪细小病毒、猪狂犬病毒、猪乙型脑炎等病原检测结果均为阴性;构建的荧光定量标准曲线Ct值与模板浓度呈良好的线性关系,检测质粒的敏感性可达83.4copies/μL,检测病毒RNA的敏感性可达7.1fg/μL,比多重RT-P...

• 出版日期2013
• 单位四川省畜牧科学研究院; 四川农业大学