科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的制备和鉴定鼠抗虾主要变应原TM的单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb)。方法用重组TM蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞株诱导小鼠产生腹水,再用蛋白A亲和层析法纯化抗体。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性,对常见食物的检测。结果获得4株可稳定分泌鼠抗虾主要变应原TM的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1。且4株单抗均具有良好的效价。ELISA和Western Blotting分析表明该4株单抗均能识别重组TM蛋白和天然的虾提取物。结论成功制备了4株鼠抗虾主要变应原TM的单克隆抗体,为建立TM检测及纯化方法奠定了基础。
- 出版日期2010
- 单位深圳大学; 南昌大学医学院; 呼吸疾病国家重点实验室
