泥蚶(Tegillarca granosa)精氨酸激酶的基因克隆与表达

作者：李松伟; 李晔; 李成华; 李太武; 苏秀榕

来源：海洋与湖沼, 2011, (01): 119-123.

• 泥蚶
• 精氨酸激酶
• 基因克隆与表达
• 多克隆抗体 Tegillarca granosa, Arginine kinase, Genic cloning and expression, Polyclonal antibody

利用PCR扩增技术,从泥蚶的cDNA文库中克隆出了精氨酸激酶(arginine kinase)基因,并进行了原核表达。精氨酸激酶是调节能量代谢的重要酶类,在无脊椎动物体内能量平衡过程中起重要作用。结果表明,泥蚶的精氨酸激酶全长1601bp,包括5′非翻译区(5′-UTR)序列332bp,3′非翻译区(3′-UTR)序列246bp、1023bp的开放阅读框序列(ORF),编码340个氨基酸,具有精氨酸激酶典型的酶活性部位氨基酸序列(CPTNLGT)。构建了原核表达质粒AK-pET-28a(+)转化表达菌株,经IPTG诱导表达后,获得了与预期的分子量大小一致的表达产物。利用该目的蛋白制备了泥蚶精氨酸激酶的特异性多克隆抗体,经Western blot证明该蛋白为精氨酸激酶。

• 出版日期2011
• 单位宁波城市职业技术学院; 宁波大学