蒙古绵羊Ghrelin基因的克隆和原核表达

作者：梁建荣; 曹贵方; 赵鹏伟; 温世勇; 程兰玲; 凃勇

来源：畜牧兽医学报, 2011, (12): 1782-1786.

• Ghrelin
• 基因克隆
• 原核表达
• 蒙古绵羊 Ghrelin
• gene cloning
• prokaryotic expression
• Mongolia sheep

为了克隆蒙古绵羊Ghrelin基因,构建其原核表达载体,并检测其在大肠杆菌中的表达情况。本研究用RT-PCR方法从蒙古绵羊胃组织mRNA扩增获得Ghrelin基因的cDNA序列,克隆到pMD-19T载体后进行序列分析。将测序正确的cDNA序列与原核表达载体pET-32a( )连接,并转化BL21(DE3)大肠杆菌。经IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明克隆的蒙古绵羊Ghrelin基因序列与已发表基因序列有2个碱基的差异,该碱基的变化并不影响氨基酸序列,目的蛋白主要以可溶性形式存在,Western-blot初步证实了所获得的融合蛋白是特异的。本研究成功构建了...

• 出版日期2011
• 单位内蒙古农业大学