酮古龙酸菌细胞色素c的表达、成熟及活性分析

作者：程红; 熊向华; 赵岩; 汪建华; 张怡轩; 张惟材

来源：生物技术通讯, 2011, (04): 488-492.

• 细胞色素c
• 酮古龙酸菌
• 电子传递
• 血红素染色 cytochrome c
• Ketogulonigenium vulgar
• electron transfer
• heme staining

目的:从酮古龙酸菌Y25中扩增细胞色素c基因,在大肠杆菌中表达、成熟并进行生物活性分析。方法:从酮古龙酸菌Y25基因组中PCR扩增细胞色素c基因,构建pET22b表达载体;从大肠杆菌BL21(DE3)中扩增细胞色素c成熟基因簇ccmABCDEFGH,连接到带有山梨糖脱氢酶组成型启动子的pBBR1MCS2-P200载体中;将构建的2个质粒共转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后进行血红素染色检测;通过氧化还原光谱法对Ni柱亲和纯化的重组蛋白进行活性分析。结果:扩增得到1404 bp的细胞色素c基因及6481 bp的ccmABCDEFGH基因簇;重组菌株经IPTG诱导表达后行SDS-...

• 出版日期2011
• 单位沈阳药科大学; 中国人民解放军军事医学科学院