大容量人源天然噬菌体抗体库的构建

作者：吴永强; 董关木; 秦思远; 杨晓明

来源：中国生物制品学杂志, 2008, (08): 647-650.

• 嗜菌体
• 抗体库
• Fab抗体 Phage
• Antibody library
• Fab antibody

目的构建大容量(>108)的人源天然噬菌体抗体库。方法提取人外周血淋巴细胞mRNA,反转录出cDNA第一链,以此为模板,PCR扩增重链(VH)和轻链(VL)基因片段。将VL基因PCR产物插入含Loxp和Loxp511序列的pDF载体中,电转化大肠杆菌XL1-Blue,构建轻链库,再将VH基因PCR产物插入轻链库载体中,电转化大肠杆菌XL1-Blue,构建初级库。进一步用初级库超感染BS1365菌,使其VH与VL发生重组,获得重组库,再利用重组库感染大肠杆菌XL1-Blue,构建工作库。结果所有VH和VL亚类基因的扩增产物片段大小均与理论值相符,轻重链基因的克隆效率均为100%。初级库容量为10...

• 出版日期2008
• 单位中国食品药品检定研究院