circ＿0007059/miR-421对皮肤鳞状细胞癌发生及发展的影响

作者：李旭阳; 尹光文; 郑云鹏; 金芳草; 李冬芹; 蔡丙杰

来源：中国皮肤性病学杂志, 2021, 1-17.

DOI：10.13735/j.cjdv.1001-7089.202101051

• circ＿0007059
• miR-421
• 皮肤鳞状细胞癌
• 增殖
• 迁移
• 侵袭
• 凋亡

目的 探讨circ＿0007059/miR-421对皮肤鳞状细胞癌（简称皮肤鳞癌）细胞生物学行为的影响及其对PDCD4的调控作用。方法 采用qRT-PCR法检测皮肤鳞癌组织、癌旁组织中circ＿0007059与miR-421的表达量；采用免疫组织化学法检测皮肤鳞癌组织中PDCD4蛋白阳性率；体外培养皮肤鳞癌细胞SCC-13，随机分为以下几组：pcDNA组、pcDNA-circ＿0007059组、si-NC组、si-circ＿0007059组、anti-miR-NC组、anti-miR-421组、pcDNA-circ＿0007059+miR-NC组、pcDNA-circ＿0007059+miR-421组。采用qRT-PCR法与Westernblot实验分别检测细胞中circ＿0007059、miR-421、PDCD4的表达量；采用MTT实验、平板克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验、Transwell小室实验分别检测增殖、克隆形成、凋亡、迁移及侵袭；双荧光素酶报告基因实验检测circ＿0007059与miR-421的靶向关系，以及miR-421与PDCD4的靶向关系。结果 与癌旁组织比较，皮肤鳞癌组织中circ＿0007059的表达水平降低（P＜0.05），miR-421的表达水平升高（P＜0.05），PDCD4蛋白阳性率降低（P＜0.05）；与pcDNA组比较，pcDNA-circ＿0007059组miR-421的表达水平降低（P＜0.05），PDCD4蛋白水平升高（P＜0.05），细胞活力降低（P＜0.05），集落形成数与侵袭细胞数减少（P＜0.05），迁移距离减小（P＜0.05），凋亡率升高（P＜0.05）；与si-NC组比较，si-circ＿0007059组miR-421的表达量升高（P＜0.05），PDCD4蛋白水平降低（P＜0.05），细胞活力升高（P＜0.05），集落形成数和侵袭细胞数增多（P＜0.05），细胞凋亡率降低（P＜0.05），迁移距离增加（P＜0.05）；circ＿0007059可靶向结合miR-421，PDCD4是miR-421的靶基因；与anti-miR-NC组比较，anti-miR-421组PDCD4蛋白水平升高（P＜0.05），细胞活力降低（P＜0.05），集落形成数与侵袭细胞数减少（P＜0.05），迁移距离减小（P＜0.05），凋亡率升高（P＜0.05）；与pcDNA-circ＿0007059+miR-NC组比较，pcDNA-circ＿0007059+miR-421组PDCD4蛋白水平降低（P＜0.05），细胞活力升高（P＜0.05），集落形成数与侵袭细胞数增多（P＜0.05），迁移距离增长（P＜0.05），凋亡率降低（P＜0.05）。结论 circ＿0007059过表达可调控miR-421/PDCD4分子轴而抑制皮肤鳞癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及诱导细胞凋亡。

• 出版日期2021-8-27
• 单位郑州大学第一附属医院