大肠杆菌MinCD蛋白复合物纯化方法和晶体筛选

作者：金瑾; 杨少媛; 朱嘉; 雷振; 郑积敏; 贾宗超

来源：化学通报, 2015, 78(01): 85-88.

DOI：10.14159/j.cnki.0441-3776.2015.01.018

• 细胞分裂
• 复合物
• 结晶
• MinC
• MinD

大肠杆菌在细胞分裂时,细胞中部潜在分裂位点的选择受到Min系统(Min C、Min D和Min E蛋白)的精确调控,其中Min C与Min D可以形成复合物以抑制Z分裂环在错误的位置形成。本研究采用基因克隆方法获得min C、min D基因的克隆,并表达得到Min C和Min D的重组蛋白,用亲和层析与凝胶过滤层析对所得蛋白进行纯化,通过min C、min D分别单独转化、表达纯化后混合和min C、min D共转化法两种方法得到Min CD蛋白复合物,并分别对其进行晶体筛选。结果表明,共转化法得到的Min CD复合物纯度较好,且比例约为2∶1,通过晶体筛选初步获得针状蛋白晶体,为Min CD复合物的结构解析提供了实验基础。

• 出版日期2015
• 单位北京师范大学