多重荧光定量PCR方法鉴定布鲁氏菌属及牛羊种布鲁氏菌研究

作者：刘志国; 罗成旺; 张利; 姜海; 赵鸿雁; 朴东日; 田国忠; 崔步云

来源：中国人兽共患病学报, 2012, (09): 869-874.

• 布鲁氏菌
• 荧光定量聚合酶链式反应
• 鉴定
• 评价 Brucella
• fluorescent quantitative PCR
• identification
• evaluation

目的利用多重实时荧光PCR技术,建立快速鉴定布鲁氏菌的方法。方法根据布鲁氏菌特异性基因BCSP31,AlkB/IS711和BMEI1162/IS711的部分片段作为靶基因,分别设计探针引物,将扩增产物连接到PUCm18-T载体上,制备标准品及标准曲线,确定此方法的灵敏度。利用布鲁氏菌的其他生物型菌株和同源性较近的致病菌(汉赛巴尔通体、霍乱弧菌、土拉弗朗西斯菌、大肠杆菌O157∶H7、大肠杆菌O∶16、小肠结肠炎耶尔森菌O∶9、沙门氏菌N群血清型、嗜麦芽假单胞菌)验证所建立方法的特异性。通过布鲁氏菌标准菌株建立方法,优化体系后扩增97株地方株进行验证。结果应用多重Taq-Man荧光PCR技术检测...

• 出版日期2012
• 单位内蒙古农业大学; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所