捻转血矛线虫肌动蛋白基因的克隆与表达及其DNA疫苗的构建

作者：严若峰; 闫峰宾; 王晶晶; 徐立新; 宋小凯; 李祥瑞

来源：南京农业大学学报, 2012, 35(04): 87-93.

• 捻转血矛线虫
• 肌动蛋白基因
• 原核表达
• DNA疫苗 Haemonchus contortus
• actin gene
• prokaryotic expression
• DNA vaccine

根据秀丽新杆线虫等其他几种线虫的肌动蛋白(Actin)开放阅读框(ORF)设计简并引物,以捻转血矛线虫总RNA为模板,合成cDNA,用RT-PCR方法扩增出约为1 100 bp的DNA片段。将该片段克隆到T载体后进行序列测定和分析,结果表明该基因的ORF为1 131 bp,与秀丽新杆线虫、新杆状线虫、肿孔古柏线虫等的同源性高达86%以上,推导出其蛋白质序列含有376个氨基酸,与胎生网尾线虫、秀丽新杆线虫、新杆状线虫、马来丝虫等的肌动蛋白相似性均为98%以上,说明成功克隆了捻转血矛线虫actin基因。将捻转血矛线虫肌动蛋白基因的ORF克隆到pET-28a(+)中,构建了原核表达载体,用IPTG进...

• 出版日期2012
• 单位南京农业大学