H7亚型禽流感病毒核酸标准品制备及双探针荧光RT-PCR检测研究

作者：高志强; 张鹤晓; 蒲静; 张伟; 谷强; 乔彩霞; 张利峰; 汪琳

来源：中国兽医杂志, 2014, (11): 13-15+18.

• 禽流感病毒
• H7亚型
• 标准品
• 荧光RT-PCR Avian influenza
• Subtype H7
• Reference material
• Real-time RT-PCR

从禽流感病毒A/Chicken/1/2002(H7N1)核酸中扩增了完整HA的基因编码序列,克隆测序后,采用体外转录方法制备c RNA。用RNA保存液稀释至含量约108Copies/μL。分装后进行均匀性和稳定性检验,通过8家实验室联合定值,取平均值作为定值结果;经统计分析计算了该标准品的不确定度。此外,采用Taq Man方法,根据禽流感病毒H7亚型的血凝素基因的末端,采用1对引物和2条MGB探针,建立了禽流感病毒H7亚型Taq Man荧光RT-PCR快速检测技术。应用建立的方法对研制的标准品进行检测,检测限可达10基因拷贝;对新城疫病毒及其他亚型的流感病毒核酸进行检测,结果表明,建立的方法特...

• 出版日期2014
• 单位中华人民共和国北京出入境检验检疫局