摘要

目的 观察柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织细胞自噬的影响。方法 将SD大鼠随机分为假手术组(SO组)、SAP组和柴黄清胰活血颗粒治疗组(CH组),应用3.5%牛磺胆酸钠建立SAP模型,CH组予以柴黄清胰活血颗粒灌胃,SO组和SAP组予以生理盐水灌胃,12、24 h分批处死大鼠。苏木素-伊红(HE)染色对胰腺组织进行病理学评价;Western blot检测自噬效应蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、可溶/不可溶自噬底物募集蛋白(Soluble/Insoluble p62)、溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)相对表达水平;免疫荧光双染色法检测LC3表达,并进行LC3和Insulin共定位分析。结果 12、24 h时,与SO组比较,SAP组和CH组病理学评分明显升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、LAMP2、p62(Insoluble)相对表达水平明显升高,p62(Soluble)相对表达水平明显降低,LC3免疫荧光强度升高,差异有统计学意义(P<0.05)。12、24 h时,与SAP组比较,CH组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、LAMP2、p62(Insoluble)相对表达水平降低,LC3免疫荧光强度降低,差异有统计学意义(P<0.05);p62(Soluble)相对表达水平无差异(P>0.05)。蛋白共定位分析结果显示,SAP组LC3和胰岛素(Insulin)在胰岛细胞的细胞质区域、分泌颗粒区域中均有分布,SO组及CH组未见明显共定位表现。结论 柴黄清胰活血颗粒可抑制SAP大鼠胰腺组织Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62(Insoluble)、LAMP2相对表达水平,从而抑制SAP中异常活跃自噬,提高自噬通量,发挥对胰腺细胞的保护作用。