醌茜素抑制PI3K通路的磷酸化对宫颈癌CaSki细胞凋亡和自噬的影响

作者：王华斌^*; 干晓琴; 丁勇利; 李永文; 刘智涛; 李玥桦

来源：安徽医科大学学报, 2020, 55(12): 1893-1900.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.12.015

• 醌茜素
• 宫颈癌Caski细胞
• 自噬
• 凋亡
• PI3K通路的磷酸化

目的探究醌茜素对宫颈癌Caski细胞的作用。方法体外培养人宫颈癌Caski细胞,用不同浓度醌茜素(0、1、4、12μmol/L)的醌茜素培养液对其进行预处理,以5-氟尿嘧啶组(5μmol/L)作为阳性对照。通过BrdU染色检测Caski细胞增殖能力的变化;流式细胞技术检测Caski细胞凋亡;免疫荧光检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)含量; Western blot检测增殖、凋亡、自噬以及PI3K通路磷酸化相关蛋白的表达;注射CaSki细胞构建移植瘤裸鼠模型并进行体内验证。结果与对照组(0μmol/L)相比,4μmol/L和12μmol/L醌茜素处理后的宫颈癌CaSki细胞增殖能力明显减弱,BrdU阳性细胞率明显降低,Ki67蛋白的表达量也显著下降。随着醌茜素浓度增大,宫颈癌CaSki细胞凋亡率和Cleaved caspase-3的表达量逐渐升高,12μmol/L醌茜素处理组效果最为明显。ATG5的表达量随醌茜素浓度增加而逐渐降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值和p62的表达量逐渐增加,而且4μmol/L和12μmol/L醌茜素处理组与对照相比均具有显著差异。与单独使用自噬抑制剂3-MA处理相比,3-MA和高浓度(12μmol/L)醌茜素联合处理后能明显的逆转3-MA对自噬的抑制作用以及PI3K通路磷酸化的促进作用。体内实验表明,与对照组相比,加药组的瘤体型和重量明显减小,而且其Ki67、ATG5的表达量显著减少,Caspase-3的表达量显著升高,PI3K、AKT、mTOR蛋白磷酸化水平明显降低,与体外实验结果一致。结论醌茜素能抑制宫颈癌CaSki细胞增殖、促进其自噬和凋亡,作用机制可能是通过抑制PI3K通路蛋白磷酸化。

• 出版日期2020
• 单位成都市妇女儿童中心医院; 电子科技大学; 四川省医学科学院; 四川省人民医院