膜荚黄芪种子中2种几丁质酶的分离纯化及活性测定

作者：费凡; 闫巧娟; 江正强; Kumar Narasimha

来源：西北植物学报, 2009, 29(12): 2521-2526.

• 黄芪种子
• 几丁质酶
• 纯化
• 亲和层析

运用传统的层析技术对膜荚黄芪种子中两种几丁质酶进行分离纯化,并对分离纯化中各个步骤得到的蛋白进行了活性研究。结果表明:(1)粗提液的硫酸铵沉淀经再生几丁质亲和柱和凝胶过滤层析Sephadex G-75得到几丁质酶A。(2)粗提液的硫酸铵沉淀经离子交换色谱DE-52、CM、凝胶过滤层析Sephadex G-75得到几丁质酶B。(3)几丁质酶A、B的比活性分别为35.6 U/mg和4.1 U/mg。(4)从膜荚黄芪种子中分离纯化的几丁质酶A和B均为糖蛋白,含糖量分别为6.1%和5.8%。(5)SDS-PAGE显示,几丁质酶A、B的分子量分别为35.5 ku、39.6ku;凝胶过滤层析测定几丁质酶A、B的分子量分别为36.9 ku4、0.8 ku;表明几丁质酶A、B均为单亚基蛋白。

• 出版日期2009
• 单位中国农业大学