大豆花叶病毒间接ELISA检测方法的建立及应用

作者:李小宇; 张春雨; 张伟; 苏前富; 苏颖; 张金花; 李建平; 王永志*
来源:东北农业科学, 2019, 44(01): 22-27.
DOI:10.16423/j.cnki.1003-8701.2019.01.006

摘要

为快速有效地检测大豆花叶病毒(Soybean Mosaic Virus,SMV),本研究利用已制备的大豆花叶病毒衣壳蛋白(Coat Protein,CP)及其单克隆抗体,通过优化ELISA条件为:检测材料抗原包被酶标板37℃1 h,检测抗体工作浓度125 ng/mL,孵育60 min,酶标抗体工作浓度100 ng/mL,孵育30 min;SMV CP蛋白最低检测限为3.23 ng/mL;该方法重复性变异系数小于3%,重复性良好;运用上述检测条件与RTPCR检测方法对田间样品进行随机检测,结果显示一致率高达94%。SMV间接ELISA检测方法的成功建立,为SMV快速检测试剂盒及试纸条的研发奠定了基础。

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