干扰FOS表达对KSHV感染的神经元细胞增殖的影响

作者：徐慧玲; 曹冬冬; 李英; 张晓艳; 吴淑媛; 王晓露; 潘**; 李冬妹^*

来源：石河子大学学报(自然科学版), 2020, 38(03): 359-364.

DOI：10.13880/j.cnki.65-1174/n.2020.22.016

• 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒
• FOS
• 神经元细胞
• 增殖

目的探讨在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma associated herpesvirus,KSHV)感染的神经元细胞中干扰FOS基因表达,对细胞增殖和KSHV病毒的影响。方法采用强力霉素和丁酸钠诱导islk.219细胞的病毒r KSHV.219进入裂解态并提取病毒,采用病毒提取液感染SH-SY5Y细胞,采用荧光显微镜观察GFP确定感染成功,采用real time-PCR检测KSHV感染与未感染SH-SY5Y细胞FOS基因的表达;构建FOS基因的干扰质粒;并与KSHV感染的SH-SY5Y细胞中干扰FOS的表达,采用real time-PCR和Western blot确定干扰效率,采用real time-PCR检测干扰与未干扰细胞中KSHV病毒因子LANA、RTA以及K8. 1的mRNA表达情况,采用MTT法检测细胞增殖能力,PI染色结合流式细胞技术检测细胞周期;结果重组病毒r KSHV. 219能够成功感染SH-SY5Y细胞,FOS基因在KSHV感染的SH-SY5Y细胞中表达上调(P<0.05);干扰FOS基因后,FOS基因的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05); KSHV病毒因子LANA、RTA以及K8. 1的mRNA表达水平均有降低(P<0.05); MTT结果提示,干扰FOS表达抑制了KSHV感染的SH-SY5Y细胞增殖(P<0.05);干扰48 h后感染细胞周期被阻滞在G0/G1期(P<0.05)。结论 KSHV能够感染神经元细胞SH-SY5Y,干扰FOS表达能抑制感染细胞的增殖,阻滞细胞周期G0/G1期的进程,靶向干扰FOS在KSHV感染引起的神经系统疾病的治疗中具有一定的价值。

• 出版日期2020
• 单位石河子市妇幼保健院; 生物化学教研室; 新疆生产建设兵团; 石河子大学