摘要

为了快速筛选出具有中和活性的抗新型布尼亚病毒全人源抗体,本研究收集2022年新发发热伴血小板减少综合征康复患者外周血,使用带有6×His标签新型布尼亚病毒Gn蛋白,Rb mAb to 6×His tag(PE)和Ms mAb to CD19(APC)抗体对分离出的外周血单个核细胞进行孵育,流式细胞术分选出双阳性细胞进行单细胞测序和VDJ测序。分析测序结果后得到抗体可变区序列,随后将抗体进行体外表达,并验证其结合活性和中和活性。结果显示,成功表达出22株重组抗体;ELISA检测结果显示22株抗体均具有较好的结合活性;Western bolt检测结果显示3株抗体具有较好的结合活性;中和试验结果显示上述抗体均未表现出较好的中和活性。结果表明,重组抗体的成功表达和功能验证,为后续抗体药物的筛选奠定了一定的技术基础。