黑曲霉C112纤维二糖酶基因的克隆与生物信息学分析

作者：朱永瑞; 曾柏全; 曾磊; 刘辉

来源：生物技术通报, 2016, 32(02): 116-122.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.02.015

• 黑曲霉C112
• 纤维二糖酶
• 克隆
• 生物信息学

以紫外诱变获得的高产纤维素酶黑曲霉C112菌株为模板,采用RT-PCR技术克隆黑曲霉C112的纤维二糖酶基因bgl(Gen Bank登录号:KP307454);该基因全长2 934 bp,含有非编码序列,编码860个氨基酸,等电点为4.70,核酸序列与数据库的Aspergillus niger(Gen Bank登录号JX982101.1)同源性达到了99%;生物信息学分析表明,纤维二糖酶为具有一定亲水性的稳定酸性分泌蛋白;二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲为结构元件;该基因经IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明,重组表达产物的相对分子量约为93.3 k D,与预期相符;纤维二糖酶在大肠杆菌BL21中胞内融合表达,重组蛋白p NPG酶活为5.847U/m L,最适反应温度为50℃,最适p H值为5.0。

• 出版日期2016
• 单位中南林业科技大学