干扰RNA抑制组织因子表达对阿霉素诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的影响

作者：方峻; 汤浩; 夏凌辉; 周木想; 陈燕; 魏文宁; 胡豫; 宋善俊

来源：中华血液学杂志, 2007, (09): 594-597.

DOI：10.3760/j.issn:0253-2727.2007.09.006

• 组织因子
• 神经母细胞瘤
• 细胞凋亡
• 阿霉素

目的研究组织因子(TF)表达对阿霉素诱导人神经母细胞瘤细胞系 SK-N-MC 细胞凋亡的影响。方法以 Western blotting 法检测 SK-N-MC 细胞 TF 表达。分子生物学方法构建 TFsiRNA-pSUPER 表达载体,以脂质体介导进行基因转染。以水溶性四唑盐(WST)法检测阿霉素细胞毒性。以Western blotting 法检测阿霉素诱导的 caspase-3、多聚 ADP 核糖转移酶(PARP)的活化水平。以 Hochest33342染色,荧光显微镜下检测凋亡细胞。结果①SK-N-MC 细胞高表达 TF;②转染 TF siRNA-pSUPER 表达载体的 SK-N-MC 细胞,TF 表达水平呈剂量依赖性降低;③转染 TFsiRNA-pSUPER 的 SK-N-MC 细胞及转染 pSUPER 质粒的对照细胞分别以不同浓度阿霉素处理24 h,前者与后者相比存活细胞数显著降低;④转染 TFsiRNA-pSUPER 的 SK-N-MC 细胞及转染 pSUPER 质粒的对照细胞分别以阿霉素处理4、8 h,可见前者较后者 caspase-3、PARP 活化增强;⑤转染 TFsiRNA-pSUPER 的 SK-N-MC 细胞与对照细胞相比,经阿霉素处理后的凋亡细胞数显著增多(P<0.05)。结论人神经母细胞瘤 SK-N-MC 细胞中 TF 异常高表达,以 siRNA 特异性下调 TF 表达后,可增强阿霉素细胞毒性及其诱导的肿瘤细胞凋亡。肿瘤细胞中 TF 的异常高表达可能参与阿霉素诱导凋亡的调控。

• 出版日期2007-9-14
• 单位华中科技大学同济医学院附属协和医院