一种新孢子虫病实时RPA快速检测方法的建立及应用

作者：俞海怡; 沈金阳; 李姣姣; 廖磊; 陈仕琦; 汤文连; 马金鸣; 王伟玲; 吉敬^*

来源：江苏海洋大学学报(自然科学版), 2021, 30(04): 30-34.

• 实时重组酶聚合酶等温扩增
• 犬新孢子虫
• 分子诊断
• 快速检测

犬新孢子虫(Neospora caninum)引起的新孢子虫病严重影响着养牛业的发展,目前对于该疾病尚无有效治疗的药物或疫苗。为了提高对新孢子虫病的诊断及预防,根据犬新孢子虫中特异性保守基因NC-5建立了一种新型实时RPA检测方法;同时进行了特异性以及敏感性试验,并应用该方法对国内养牛场收集的32份临床样品进行了检测。结果表明:所建立的实时RPA检测方法结果准确、操作便捷,仅需25 min即可得到检测结果。在特异性试验中仅有犬新孢子虫发生了特异性扩增,其余对照病原体在检测中均未有扩增结果;在敏感性试验中最低检测限为37拷贝/反应;在32份临床样品试验中有16份阳性样品,与已有检测技术相比,准确率达100%。说明该方法具有特异性强、灵敏度高、检测时间短等优势,为新孢子虫病的快速检测奠定了基础。

• 出版日期2021