大薯ISSR-PCR反应体系的优化

作者:程文杰; 罗欣; 周鑫; 黄小龙; 黄东益
来源:生物技术通报, 2010, (09): 129-133+153.
DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2010.09.039

摘要

以大薯为材料,通过试验优化了ISSR-PCR反应体系中的主要成分用量及浓度、退火温度对大薯ISSR扩增结果的影响。试验表明:在20μL的反应体系中,Mg2+的浓度为1.875 mmol/L,dNTPs浓度为0.500 mmol/L,引物的浓度为1.0μmol/L,TaqDNA聚合酶的用量为1U,模板DNA的用量为60 ng,在48℃的退火温度下45个循环,能得到清晰、多态性高的ISSR带谱。

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