一株针对猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株GP5蛋白的单克隆抗体制备及鉴定

作者：秦义娴; 刘丹; 邓永; 高金源; 苏佳; 朱真; 吴华伟^*

来源：中国兽药杂志, 2021, 55(10): 1-6.

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• NADC30-lke毒株
• GP5蛋白
• 单克隆抗体

为获得针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)NADC30-like毒株GP5蛋白的单克隆抗体,采用表达纯化的PRRSV NADC30-like毒株的GP5蛋白按常规方法免疫小鼠,采用间接免疫荧光方法筛选出1株阳性杂交瘤细胞(命名为3E10),经3次亚克隆后制备腹水并进行纯化鉴定。结果显示:该杂交瘤细胞连续传代20代后细胞上清液的IFA效价仍不低于1∶40。纯化后的单克隆抗体腹水浓度为0.204 mg/mL,亚类鉴定为IgM。特异性检测显示3E10单克隆抗体能与2株PRRSV NADC30-like毒株发生荧光反应,而与4株高致病性PRRSV疫苗毒株、2株经典株PRRSV疫苗毒株以及CSFV、PCV2、BVDV及Marc-145细胞均无荧光反应,显示出较好的应用前景。针对PRRSV NADC30-like毒株GP5蛋白的单克隆抗体的成功制备,为PRRSV NADC30-like诊断试剂的研制提供了坚实基础。

• 出版日期2021
• 单位中国兽医药品监察所