UPLC-HRMS法定量分析小鼠组织中的6-氧-甲基鸟嘌呤

作者：李琛; 王荣浩; 毛健; 霍现宽; 王丁众; 张建勋

来源：烟草科技, 2017, 50(05): 53-59.

DOI：10.16135/j.issn1002-0861.2017.0017

• NNK
• 6-氧-甲基鸟嘌呤(6-O-MeG)
• 吡唑
• 5-甲氧基补骨脂素(5-MOP)
• C57BL/6小鼠
• 超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)

为评价4-(N-甲基-N-亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)的器官致癌性,建立了一种定量分析C57BL/6小鼠组织中DNA甲基化加合物6-氧-甲基鸟嘌呤(6-O-MeG)的超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)方法,并分别对NNK染毒后生理盐水对照组、吡唑处理组和5-甲氧基补骨脂素(5-MOP)处理组小鼠肝脏和肺中6-O-MeG的含量进行了测定。用试剂盒提取组织样品DNA,提取物在80℃下酸解后加入内标6-氧-甲基-d3-鸟嘌呤([CD3]6-O-MeG),经过HLB固相萃取柱净化后进行UPLC-HRMS分析。结果表明:(1)6-O-MeG在0.0510.00 ng/mL内线性良好(R2=0.999 8),检出限0.011ng/mL,回收率92.1%102.2%,日内和日间精密度分别为1.10%4.34%和1.89%6.58%。(2)给药4 h后,吡唑处理组小鼠肝脏和肺中6-O-MeG的含量分别为对照组的2.09和1.87倍,5-MOP处理组则分别为对照组的0.32和0.67倍,表明小鼠体内的CYP2A5在NNK的代谢活化过程中起到重要作用。该方法样品前处理简单、选择性好、灵敏度高,适用于小鼠组织中6-O-MeG的测定。

• 出版日期2017
• 单位中国烟草总公司郑州烟草研究院