分选卵巢癌腹水中癌细胞的实验研究

作者：邢宝玲; 郭存存; 唐正华; 董一善; 葛素梅

来源：中国现代医学杂志, 2018, 28(17): 6-12.

• 卵巢癌
• 腹水
• 癌细胞
• 免疫细胞化学
• 荧光原位杂交

目的探讨免疫荧光细胞化学法(ICC)联合荧光原位杂交法(FISH)分离卵巢癌腹水中癌细胞的可行性。方法复制卵巢癌腹水模型,分阴性对照组和4个阳性组(A、B、C、D组),即4 ml良性腹腔冲洗液中分别有0、5、10、20和40个标记线粒体绿色荧光(Mito-Tracker Green)的卵巢癌SKOV3细胞,每组样本制备3份。复制卵巢癌裸鼠原位移植模型,分阳性组和阴性对照组,每组6只BALB/c裸鼠,阳性组裸鼠在卵巢接种SKOV3细胞,各组分别在接种后4、6和8周取2只裸鼠收集腹水。采用磁激活细胞分选法富集癌细胞,用ICC-FISH鉴别分离样本中的癌细胞,以8号染色体探针(CEP8)信号>2个为FISH阳性标准,规定DAPI+/EBA-1+/Mito-Tracker Green+/CEP8+细胞为检测癌细胞。结果腹水模型:阴性对照组和阳性组均可见EBA-1阳性细胞,阳性组均有标记的SKOV3细胞,癌细胞的回收率为20%50%,12个阳性样本中9个样本的检测率为100%。裸鼠模型:在200倍显微镜视野下,4、6和8周每个视野的SKOV3细胞数最多分别为3、8和15个。结论将卵巢癌腹水磁富集后,ICC-FISH可以准确地识别其中的癌细胞,该方法为研究和治疗卵巢癌提供了新思路。

• 出版日期2018
• 单位常州市妇幼保健院; 南京医科大学