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摘要
本实验的目的为建立可同时检测鲜切哈密瓜中的单增李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7的多重PCR检测方法。根据单增李斯特菌inl A基因、鼠伤寒沙门氏菌inv A基因、大肠杆菌O157:H7的wzy基因设计三对特异性引物。对多重PCR反应体系中的引物浓度、退火温度、Mg2+浓度、d NTP浓度进行了优化,并确定适宜的多重PCR反应体系及反应条件。结果表明:25μL反应体系,10×PCR buffer为2.5μL,Mg Cl2(25mmol/L)为3.5μL,d NTPs(2.5mmol/L)为2μL,inl A上下游引物(5μmol/L)为1μL,inv A上下游引物(5μmol/L...
- 单位大连民族大学
