大肠杆菌多重耐药调控基因marR的克隆及其原核表达

作者：许皓; 马红霞; 马颖; 林雁春

来源：黑龙江畜牧兽医, 2010, (13): 17-19.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2010.13.009

• 大肠杆菌
• marR
• 克隆
• 原核表达 Escherichia coli
• marR
• clone
• prokaryotic expression

为获得MarR多克隆抗体,试验以大肠杆菌ATCC25922基因组为模板,根据GenBank中大肠杆菌的marR基因序列设计引物,PCR扩增出长约435bp的marR基因片段,将所得片段与pMD18-T载体连接,转化至JM109大肠杆菌中,筛选阳性克隆,其质粒中插入序列的测序结果与GenBank中报道一致,从阳性克隆中提取质粒,经BamHⅠ和XhoⅠ酶切回收435bp的目的片段,定向克隆到pET-28a( )表达载体中,提取阳性质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中获得阳性克隆。结果表明:经IPTG诱导阳性菌收集表达产物,通过SDS-PAGE分析证实marR基因得到表达;经Western-blo...

• 出版日期2010
• 单位吉林农业大学