siRNA表达载体对大鼠心肌H9c2细胞牛磺酸合成限速酶-CSD基因表达的抑制作用

作者：杨群辉; 杨硕; 冯颖; 吕秋凤; 杨建成; 胡建民

来源：营养学报, 2012, (04): 317-321.

DOI：10.13325/j.cnki.acta.nutr.sin.2012.04.022

• H9c2细胞
• RNA干扰
• 半胱亚磺酸脱羧酶
• 细胞增殖 H9c2 cell
• RNAi
• CSD
• proliferation

目的研究siRNA对大鼠心肌半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)的抑制作用。方法根据已克隆的大鼠心肌CSD基因序列(EU786150)设计并构建了4个siRNAs及1个阴性对照siRNA表达质粒,利用脂质体LipofectamineTM2000将构建好的重组质粒siRNA1#、siRNA2#、siRNA3#、siRNA4#及阴性对照质粒分别转染H9c2细胞,应用荧光显微镜观察转染效率、四唑盐(MTT)法检测H9c2细胞增殖情况、实时荧光定量PCR和Western-blot检测CSD mRNA和蛋白表达。结果荧光显微镜观察细胞转染效率达70%左右;与阴性对照组、未转染组比较,siRNA1#重组质粒显著抑制...

• 出版日期2012
• 单位沈阳农业大学