酿酒酵母蔗糖酶基因的克隆、异源表达及重组酶学性质研究

作者：杜丽琴; 杨键; 朱绮霞; 杨登峰; 韦宇拓; 黄日波

来源：广西科学, 2008, (02): 184-188.

• 蔗糖酶
• 克隆
• 表达
• 酶学性质

以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到蔗糖酶基因(suc2),并将其克隆到表达载体pSE380中,将得到的重组质粒pSE-suc2转化进E.coli BL21中,利用镍金属螯合层析方法分析测定其酶学性质。重组菌株的SDS-PAGE结果显示重组蔗糖酶基因(suc 2)有60kDa目的蛋白出现,纯化的SDS-PAGE分析得到均一的蛋白条带;重组蔗糖酶的Km值为47.73mmol/L,最大反应速率为79.59mg还原糖mg-1蛋白min-1,最适温度为42℃,最适pH值为5.5,Zn2+、Cu2+对重组蔗糖酶酶活有较强的抑制作用,Ba2+、Mg2+、Mn2+对重组蔗糖酶酶活稍有激活作用。

• 出版日期2008-5-15
• 单位广西大学; 广西科学院