毒害艾美耳球虫蔗糖非酵解解旋酶2基因片段的克隆与原核表达

作者：马艺飞; 杜彩娟; 王乐乐; 刘丹丹; 许金俊; 陶建平

来源：畜牧与兽医, 2017, 49(08): 72-75.

• 毒害艾美耳球虫
• 蔗糖非酵解解旋酶2
• 克隆
• 表达

为了研究毒害艾美耳球虫蔗糖非酵解解旋酶2(SNF2)基因的功能,以提取的毒害艾美耳球虫子孢子总RNA为模板,应用RT-PCR技术扩增SNF2基因片段,克隆至pGEM-T-Easy载体,测序后构建pET30a-EnSNF2表达载体,转化大肠杆菌BL21,重组菌经测序鉴定后诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定。结果显示:克隆的片段长822 bp,编码274个氨基酸;重组蛋白大小为36 ku左右,以包涵体形式为多,能被组氨酸(HIS)单抗特异性识别,表明该基因片段获得成功表达。研究结果为制备针对毒害艾美耳球虫SNF2的多抗和进一步研究该基因的功能奠定了基础。

• 出版日期2017
• 单位扬州大学; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心